IVF方案的胚胎阶段 - ch.remediclinic.ru

胚胎学实验室是任何生殖医院的核心和灵魂，整个部门的工作成果取决于其设备和功能。我们医院的胚胎学实验室配备了最新的世界级技术：

自动通风系统确保在实验室中保持清洁空气，这是辅助生殖技术所有阶段所必需的；
安装领先的欧洲制造商的最先进的设备，并根据个性化项目进行调整，以确保胚胎学家的必要工作水平；
在与胚胎和生殖细胞一起工作时，最现代化的耗材进行了安全性测试；
实验室限制访问系统阻止了不必进入实验室的人员进入实验室，并允许保持室内的适当的无菌水平。

体外受精（IVF）方案的胚胎学部分由各阶段组成，其序列和实施质量决定了辅助生殖技术计划的结果。

IVF方案的主要阶段：

经阴道卵泡穿刺；
射精处理；
获得的卵母细胞受精（标准或ICSI方法）；
胚胎培养；
胚胎移植或冷冻保存；
辅助孵化（根据指标）；
必要时植入前基因检测下的胚胎活检。

让我们更详细地讨论这些阶段，因为它是对实验室中发生的过程的理解，使之能理解与IVF方案实施相关的许多因素。

经阴道卵泡穿刺

卵泡穿刺是包含的卵泡的采集，其在超声控制下使用特殊的针进行。获取后（为了遵循37度的所需温度制度），胚胎学家给予带有卵泡液的试管，其中含有许多成分 — 卵丘细胞中的卵细胞（卵母细胞 — 卵丘复合体）、卵泡液本身、卵泡细胞、小血块。

胚胎学家在该阶段的主要任务是尽可能快地观察卵母细胞 — 卵丘复合体，将其分离，然后将其置于一种特殊的营养培养基中，直到在孵化器条件下受精为止。我们医院的实验室在接收和将卵子从医生转移到胚胎学家的各个阶段配备了加热面（Minitube），使得可以创造最佳温度模式，这在此阶段非常重要，因为温度差异对于胚胎的进一步发育至关重要。

射精处理

将获得的卵母细胞在受精前放置培养箱中2-3小时，同时处理配偶（新鲜或冷冻）射精或供体精液。

这种处理的目的是分离形态正常的精子的移动部分，把它们从精浆、固定形式的精子、相关细胞中清楚，这可能对正常精子的功能和DNA产生负面影响。

获得的卵母细胞受精（标准或ICSI方法)

获得的卵母细胞的受精是IVF方案的关键要素。受精方法的错误选择可以否定所有以前的阶段，并不再指望IVF方案的有效性。 IVF方案有两种可能的受精方法：

标准；
ICSI — 卵胞浆内单精子注射（ intracytoplasmic spermatozoid injectio — ICSI）。

受精方法的选择主要取决于精子指标。在穿刺当天的正常射精值并且在没有其他适应症的情况下，通过标准方法进行受精。

使用标准方法，当将洗过的精子的悬浮液置于卵细胞营养培养基中时，进行天然受精过程的“模仿”，并且最强和最移动的精子细胞自主地使卵子受精。

ICSI主要是克服男性不育症的一种方法，使用该方案的主要指标是精液的各种偏差。

ICSI方法包括在显微镜下选择最流动，视觉上最正确（结构上）的精子，并使用特殊的微针将其引入卵子的细胞质中。使用这种技术可以在最严重的男性不育症下，即使精液中有单个精子，或者使用手术方法从睾丸或附睾中获取精子的情况下获得受精。

ICSI是最先进的辅助生殖技术之一，因此它需要使用现代化的专用设备（Nikonclipse倒置显微镜、Narishige Takanome显微操纵器）和优质耗材（Origio、COOK、Vitrolife）。

进行ICSI的其他可能的指标（卫生部第170N号令）：

射精功能障碍（逆行射精）；
之前体外受精（IVF）方案中卵母细胞缺乏或低受精率（低于20％）;
卵母细胞较少（少于4个）（相对指标）；
解冻卵母细胞受精；
有必要进行植入前遗传测试（相对指标）。

在某些情况下，胚胎学家可能会建议在使用ICSI受精框架下额外使用PICSI器皿（PICSI — PhysiologicIntra Cytoplasmic SpermInjection）。

PICSI技术的实质是具有正常遗传物质的形态正确和成熟的精子在其表面上具有足够数量的透明质酸受体，这使得它们能够在PICSI器皿的表面上与其结合。在此基础上，我们可以间接判断可能选择用于卵母细胞受精的精子遗传物质的质量。对于在HBA测试期间与透明质酸结合能力弱的精子，当在ICSI程序的框架下使用PICSI时，观察到临床妊娠率显著增加。使用与透明质酸结合的精子确保了利用最好的精子样品进行ICSI。

胚胎培养

在我们的操作之后，将卵子置于培养箱中，并且在16-20小时后进行受精情况评估。如果受精正确进行，受精卵在胚胎学实验室的条件下开始培养至胚泡期。该过程培养箱中胚胎连续定位的框架下，在尽可能接近母体条件的条件下进行。通过使用领先的制造商（PlanerOrigio，Binder）的现代培养箱，支持低氧含量、37度恒温、最佳湿度和pH值、缺乏光照和有害环境影响的气体混合物。在我们的实验室中，我们根据世界趋势进行长达5-6天的发育时间的胚胎培养，该方案以胚胎进入子宫或胚胎冷冻保存或这些程序的组合结束。

胚胎移植或冷冻保存

胚胎移植到子宫腔是最重要的，也是IVF方案最激动人心的阶段之一。胚胎移植分为IVF之前和之后。在我们医院利用世界领先制造商（COOK，Wallace，Gynetics，Kitazato等）的最现代和最安全的导管进行胚胎移植。这使得可以获得IVF方案的出色结果。例如，当卵巢过度刺激综合征日益严重时，如果不推荐胚胎移植，我们可以冷冻（冷冻保存）胚胎以便保存。

冷冻保存是最有前景的辅助生殖技术之一。在现代条件下，冷冻保存是实施IVF方案的绝对安全且极其有效的方式。

冷冻保存有两种类型：

慢冻；
玻璃化；

在整个进步的世界中，自然也在我们医院，目前使用后一种方法 — 玻璃化，因为其安全性，解冻后胚胎存活率高，因此怀孕率也高。

胚胎和卵母细胞的低温保存可以：

以令人难以置信的效率改变IVF周期；
预防严重的卵巢过度刺激综合征；
实施具有植入前遗传学检测的IVF方案，并为将来实施生殖功能节省材料，且机体没有额外的荷尔蒙负荷。

辅助孵化（根据指标）

在某些情况下，在IVF方案框架下，可能需要使用辅助孵化。辅助孵化是指光泽的胚壳的穿孔、变薄或完全去除，以便于从胚壳孵出并随后植入。使用辅助孵化可以克服与光泽的坯壳硬化相关的问题，以确保胚胎与子宫内膜的早期接触，在植入前进行。

一系列辅助孵化的临床适应症：

高的FSH基础水平；
以前的胚胎冷冻保存；
光泽的胚壳的厚度大于18纳米；
胚胎分裂百分比增加，卵裂球数量少于6；
后续胚胎活检。

在不同医院的辅助生殖技术方案框架内进行辅助孵化的适应症可能会有所不同，因为对于在任何特定情况下执行该操作的必要性仍然没有一致意见，关于在辅助生殖技术方案框架内使用辅助孵化的合理性，有许多相互排斥的研究。

在我们医院使用激光孵化，不需要使用额外的耗材，胚胎在几秒钟内就处于培养箱外，并且在这种操作过程中细胞损伤的可能性很小。为此，使用带有计算机设备和软件的特殊高科技激光。

必要时植入前基因检测下的胚胎活检

必须记住，进行孵化是植入前遗传筛查 IVF方案实施的不可分割的一部分。

为了获取材料并进行胚胎植入前遗传学诊断可以使用以下程序：

极体活检；
卵裂球活检；
滋养外胚层活检

我们医院主要使用滋养外胚层活检后的材料进行胚胎植入前基因检测，因为它目前在全球被认为遗传诊断的“黄金标准”。

因此，我们医院的胚胎学实验室是欧洲最现代化的实验室之一，配备了用于解决最复杂的生殖任务最新技术设备，包括最现代的低温保存和植入前遗传学诊断记录。我们医院和胚胎学实验室的设备和仪器水平，计划时实施的想法和创新，在团队中工作的生殖医生和胚胎学家的经验以及“热爱”共同事业，使我们能够实施最现代化的IVF方案，并不断提供高效的指标。

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